激光共聚焦熒光顯微鏡 活體熒光物質(zhì)檢查
激光共聚焦顯微鏡,簡稱CLSM(Confocal Laser Scanning Microscopy),是一種利用激光共振效應(yīng)進(jìn)行成像的顯微鏡。它通過使用激光束掃描樣品的不同層面,將所得到的圖像合成成一幅清晰的三維圖像。與傳統(tǒng)顯微鏡相比,激光共聚焦顯微鏡具有更高的分辨率和更強(qiáng)的穿透能力,可以觀察到更加細(xì)微的結(jié)構(gòu)和更深層次的物質(zhì)。
在活體熒光物質(zhì)的檢查中,激光共聚焦顯微鏡發(fā)揮了重要的作用。通過標(biāo)記活體細(xì)胞或組織的特定結(jié)構(gòu)或分子,激光共聚焦顯微鏡可以實(shí)時(shí)觀察到這些結(jié)構(gòu)或分子的活動(dòng)和分布情況。
在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域,它可以用于觀察細(xì)胞的生長、分裂和死亡過程,研究細(xì)胞信號傳導(dǎo)和分子交互作用等。在藥物研發(fā)中,它可以用于觀察藥物在活體細(xì)胞或組織中的分布情況,評估藥物的療效和毒性。此外,在神經(jīng)科學(xué)領(lǐng)域,激光共聚焦顯微鏡可以用于觀察神經(jīng)元的活動(dòng)和連接,揭示大腦的工作機(jī)制。
NCF950激光共聚焦顯微鏡較寬場熒光顯微鏡的優(yōu)點(diǎn):
l 能夠通過熒光標(biāo)本連續(xù)生產(chǎn)?。?.5至1.5微米)的光學(xué)切片,厚度范圍可達(dá)50微米或更大。(主要優(yōu)點(diǎn))
l 控制景深的能力。
l能夠從樣品中分離和收集焦平面,從而消除熒光樣品通??吹降慕雇狻办F霾",非共焦熒光顯微鏡下無法檢測到。(最重要的特點(diǎn))
l 從厚試樣收集連續(xù)光學(xué)切片的能力。
l 通過三維物體收集一系列圖像,用于二維或三維重建。
l收集雙重和三重標(biāo)簽,精確的共定位。
l 用于對在不透明的圖案化基底上生長的熒光標(biāo)記細(xì)胞之間的相互作用進(jìn)行成像。
l 有能力補(bǔ)償自發(fā)熒光。
耐可視共聚焦成像效果圖 尼康共聚焦成成像效果圖
NCF950激光共聚焦顯微鏡應(yīng)用,共聚焦顯微鏡在以下研究領(lǐng)域中應(yīng)用較為廣泛:
1、細(xì)胞生物學(xué):細(xì)胞結(jié)構(gòu)、細(xì)胞骨架、細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)、流動(dòng)性、受體、細(xì)胞器結(jié)構(gòu)和分布變化、細(xì)胞凋亡;
2、生物化學(xué):酶、核酸、FISH、受體分析
3、藥理學(xué):藥物對細(xì)胞的作用及其動(dòng)力學(xué);
4、生理學(xué):膜受體、離子通道、離子含量、分布、動(dòng)態(tài);
5、遺傳學(xué)和組胚學(xué):細(xì)胞生長、分化、成熟變化、細(xì)胞的三維結(jié)構(gòu)、染色體分析、基因表達(dá)、基因診斷;
6、神經(jīng)生物學(xué):神經(jīng)細(xì)胞結(jié)構(gòu)、神經(jīng)遞質(zhì)的成分、運(yùn)輸和傳遞;
7、微生物學(xué)和寄生蟲學(xué):細(xì)菌、寄生蟲形態(tài)結(jié)構(gòu);
8、病理學(xué)及病理學(xué)臨床應(yīng)用:活檢標(biāo)本的快速診斷、腫瘤診斷、自身免疫性疾病的診斷;
9、生物學(xué)、免疫學(xué)、環(huán)境醫(yī)學(xué)和營養(yǎng)學(xué)。
NCF950激光共聚焦顯微鏡配置
NCF950激光共聚焦配置表 | |
激光器 | 激光405 nm、488 nm、561 nm、640 nm |
探測器 | 波長:400-750nm,探測器:3個(gè)獨(dú)立的熒光檢測通道;1個(gè)DIC透射光檢測通道 |
掃描頭 | 最大像素大?。?096 x 4096 掃描速度:2 fps(512 x 512像素,雙向),18 fps(512 x 32像素,雙向),圖像旋轉(zhuǎn): 360° |
掃描模式 | X-T, Y-T, X-Y, X-Y-Z, X-Y-Z-T |
針孔 | 無級變速六邊形電動(dòng)針孔;調(diào)節(jié)范圍:0-1.5毫米 |
共焦視場 | φ18mm內(nèi)接正方形 |
圖像位深 | 12bits |
配套顯微鏡 | NIB950全電動(dòng)倒置顯微鏡 |
光學(xué)系統(tǒng) | NIS60無限遠(yuǎn)光學(xué)系統(tǒng)(F200) |
目鏡(視野) | 10×(25),EP17.5mm,視度可調(diào)-5~+5,接口Φ30 |
觀察鏡筒 | 鉸鏈?zhǔn)饺坑^察鏡筒,45度傾斜,瞳距47-78mm,目鏡接口Φ30,固定視度;1)目/攝切換:(100/0,50/50,0/100);2)目視/關(guān)閉目視/可調(diào)焦勃氏鏡 |
NIS60物鏡 | 10×復(fù)消色差物鏡,NA=0.45 WD=4.0 蓋玻片=0.17 |
20×復(fù)消色差物鏡,NA=0.75 WD=1.1 蓋玻片=0.17 | |
60×半復(fù)消色差物鏡,NA=1.40 WD=0.14 蓋玻片=0.17 油鏡 | |
100×復(fù)消色差物鏡,NA=1.45 WD=0.13 蓋玻片=0.17 油鏡 | |
物鏡轉(zhuǎn)換器 | 電動(dòng)六孔轉(zhuǎn)換器(擴(kuò)展插槽),M25×0.75 |
聚光鏡 | 6孔位電動(dòng)控制:NA0.55,WD26;相襯(10/20,40,60選配) |
DIC(10X,20X/40X)選配.空孔 | |
照明系統(tǒng) | 透射柯拉照明,10W LED照明; |
落射照明:寬場光纖照明 | |
中間倍率切換 | 手動(dòng)1X,1.5X、共焦切換 |
機(jī)身端口 | 分光比: |
左側(cè):目視=100:0;右側(cè):目視=100:0; | |
平臺(tái) | 電動(dòng)控制:行程范圍130 mm x100 mm (臺(tái)面325 mm x 144 mm )最大速度:25mm/s;分辨率:0.1μm - 重復(fù)精度:3μm。機(jī)械可調(diào)樣品夾板 |
調(diào)焦系統(tǒng) | 同軸粗微動(dòng)升降機(jī)構(gòu),行程:焦點(diǎn)上7下2;粗調(diào)2mm/圈,微調(diào)0.002mm/圈;可手動(dòng)和電動(dòng)控制,電動(dòng)控制時(shí),最小步進(jìn)0.01um; |
DIC插板 | 10X,20X,40X插板;可放置于轉(zhuǎn)換器插槽;選配 |
控制 | 搖桿,控制盒,USB連接線 |
軟件 | 軟件:NOMIS Advanced C |
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